* Дэниель Лэмб — главный герой игры. Бывший учёный «Проект Пикмэн», но попал в «Диксмор» — психиатрическую клинику для особо опасных уголовников на шесть лет. Из аудио записей лечебницы, мы узнаем, что Дэниель, будучи ведущим исследователем и ученым, работал над наркотиком Кортексом. Этот же наркотик и использовали во время сеансов, чтобы помочь Дэниелю восстановить частички его памяти после амнезии. Когда проект потерял финансирование, Дэниель вызвался быть подопытным кроликом на «Пикман Мост». Его жена не одобряла это решение, но Дэниель, будучи в долгах, понимал, что его семье нужны эти деньги. эксперимент прошёл удачно, но вторая личность Дэниеля, Лео Каспер — психопат и убийца, оказалась слишком сильна и была способна брать вверх над разумом Дэниеля. Пытаясь уничтожить прошлое Дэниеля, Лео сжигает все отчеты о предыдущей деятельности доктора Лэмба. Но последней ниточкой в прошлое Дэнни была его семья. Вновь взяв контроль над Дэниелем, Лео убивает его жену. Дэниеля арестовывают, и отправляют в Диксмор, но он ничего не помнит о своем прошлом. К началу игры уже проходит шесть лет. Дэнни ничего не помнит ни о своей семье, ни о проекте лишь кошмары и видения о его прошлой жизни мучают некогда гениального ученного. Единственный кто что то знает о его прошлом, является его сокамерник Лео Каспер. Однажды в Диксморе отрубается электричество и открываются все двери. Дэнни с его новым другом совершают побег. постепенно сближаясь, Дэнни узнает, что Лео убил его жену и теперь пытается завладеть его телом. Пытаясь победить его, Дэнни убивает Лео несколько раз, но тот возвращается снова и снова в отличие от других жертв Дэнни это был не человек. Не зная, как победить захватчика Дэнни впадает в отчаяние, но тут появляется призрак его жены. Она говорит, что её тело нужно предать земле и все закончится. Сделав это, Дэниель вступает в последнюю схватку с Лео. Дэнни избивает захватчика лопатой пока тот не падает и Дэнни не отрубает ему голову. после этого, Дэниель просыпается нигда, посреди дороги. Он снова ничего не помнит. В его руке записка в которой сказано: «Твое имя Давид Джойнер. Начни новую жизнь!». С любопытством оглядываясь вокруг, Дэниель сходит вниз по дороге. Прошлое его больше не волнует.
* Лео Каспер — второй по значимости герой игры. появляется только в миссиях воспоминаниях и бонусных уровнях. Психопат, сокамерник Дэнни, попавший в лечебницу также из за проекта. Раньше работал правительственным агентом имеет большой опыт в сфере афер, убийств и пр. Помогает Дэнни, бежать из тюрьмы и обучает его своему любимому делу, а именно убивать. поначалу кажется, что Лео реальный человек, но позже выясняется, что он всего лишь вторая личность Дэнни, созданная в результате эксперимента. Но так как технология была далека до совершенства, то Лео оказался живым разумом способный спокойно разговаривать с Дэнни внутри его головы. Больше всего, Лео хочет удалить разум Дэнни и продолжить жить в его теле, а затем продолжить работу над проектом. Лео проходит долгий путь вместе с Дэниелем и желая подавить его личность, убивает его жену, но поздно понимает, что доктор Лэмб не собирается сдаваться. Наконец они встречаются в сознании Дэнни. В бою оба получают ранения, но в руках у Дэниеля оказывается пистолет. Проклиная проект и все что с ним связанно, Лео подбегает к Дэниелю и наносит удар в шею. Разум Дэнни умирает и Лео получает полный контроль над его телом. Празднуя победу, Лео будит доктора Уайта, думая что перед ней Дэниель Лэмб, говорит, что уходит из проекта, но Лео приказывает собрать новую группу. Работа продолжается.
* Доктор Лаура Уайт — глава «Проекта Пикмен» и друг Дэниеля. Не согласна с методами доктора Пикмэна, особенно с наймом наёмников для убийства Дэнни и Лео. Она считает, что Дэнни должен быть схвачен живым и вылечен от личности Лео с помощью ряда терапий. В самом конце игры помогает Дэнни переместиться в собственное сознание и победить Лео.
* Доктор Пикмен — глава «Проекта». Этот проект был назван в его честь. После того как правительство решил закрыть проект в связи с его бесчеловечными методами работы, он не получая больше финансирования уходит в подполье и продолжает свои жуткие эксперименты. Бездушный и жестокий человек обожающий наблюдать за страданиями своих жертв во время эксперимента. Создал «Пикмэн Мост» проект по созданию идеального солдата. он заключался в том, что в человека импортировали личность безжалостного убийцы. Тот выполняя свою работу возвращался к обычной личности человека. Доктор Дэниель Лэмб был первым удачным опытом, но личность Лео оказалась неконтролируема. Пикмэн приказал схватить его, но это удалось сделать только в доме Лэмба, когда тот убил свою жену под контролем Лео. Дэниель Лэмб оказался заперт в Диксморе на 6 лет, в то время, как доктор Пикмэн и доктор Уайт работали над ущербом проекта. При встрече с Дэнни получает хорошую порцию транквилизатора. Очнулся Пикмэн привязанным кожаными ремнями к креслу. Перед ним стоял Дэнни (под контролем Лео) и велел ему уничтожить сознание Дэнни. понимая, что Лео погибнет ибо не является истинной личностью, Пикмэн пытается применить гипноз, но Лео, схватив скальпель, наносит несколько точных ударов в сердце обрывая его жизнь.
* Джуди — одна из сотрудниц «Пикмена», предоставляющая для Дэниеля много информации о «Проекте». Застрелена снайпером не успев передать Дэнни важную информацию.
* Майкл Грант — лучший друг и коллега Дэниеля по проекту. Был убит Лео 6 лет назад, ибо первым догадался, что личность Лео берет верх над личностью его друга.